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DETERMINACION CUANTITATIVA DEL FIBRINOGENO POR EL METODO DE CLAUSS

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El fibrinogeno, en presencia de un exceso de trombina, se transforma en Fibrina. El tiempo de formación del coagulo es inversamente proporcional a la concentración de Fibrinogeno presente en la muestra de plasma.En presencia de altas concentraciones de trombina, el tiempo necesario para la formación del coagulo en el plasma diluido es inversamente proporcional a la concentración de fibrinogeno.
Tras medir el tiempo de formación de fibrina en cada una de las diluciones trazamos la curva e incluimos el resultado de nuestro plasma,extrapolando sabremos la concentración de fibrinógeno de nuestro plasma.

Por último, hacemos la curva de calibración

Atemperamos a 37 ºC durante 4 - 5 minutos. Luego, añadimos 0'1 mL de reactivo R1(disparador)

Para realizar esta técnica necesitamos PPP, trombina bobina(pondremos un exceso para que no dependa de esta sustancia la reacción),tampón imidazol(para hacer las diluciones)y solución caolín que será el activador de la reacción.

Para realizar esta técnica necesitamos PPP, trombina bobina(pondremos un exceso para que no dependa de esta sustancia la reacción),tampón imidazol(para hacer las diluciones)y solución caolín que será el activador de la reacción.

Luego, añadimos mL de y cronometramos la formación del coagulo

Resultados: Dilución 1/30 = 54'6 seg. - 72'93 mg / dL Dilución 1/20 = 21'3 seg. - 110'50 mg/ dL Dilución 1/10 = 17'9 seg. - 221 mg / dL Dilución 1/5 = 10'9 seg. - 442 mg/ dL Muestra Paco = 24 seg. - 52 mg/ dL Control Normal = 20'4 seg. - 52'2 mg / dL Concentración del fibrinógeno = 2'21 g/ dL VALORES DE REFERENCIA: Control Normal = 2'43 (206 - 273 mg/ dL) Calibrador = 215 mg/ dL Control patológico = 201 (171 - 231 mg / dL) Fibrinógeno = 200 - 400 mg/ dL

Resultados: Dilución 1/30 = 54'6 seg. - 72'93 mg / dL Dilución 1/20 = 21'3 seg. - 110'50 mg/ dL Dilución 1/10 = 17'9 seg. - 221 mg / dL Dilución 1/5 = 10'9 seg. - 442 mg/ dL Muestra Paco = 24 seg. - 52 mg/ dL Control Normal = 20'4 seg. - 52'2 mg / dL Concentración del fibrinógeno = 2'21 g/ dL VALORES DE REFERENCIA: Control Normal = 2'43 (206 - 273 mg/ dL) Calibrador = 215 mg/ dL Control patológico = 201 (171 - 231 mg / dL) Fibrinógeno = 200 - 400 mg/ dL

Preparamos las siguientes diluciones.

Preparamos las siguientes diluciones.

No atemperar la trombina R1 Se han observado interferencias.Las reacciones inflamatorias agudas pueden aumentar el fibrinogeno circulante. La hemolisis puede causar activación de los factores de coagulación e interferir en la detección del punto final. Lo niveles altos de paraproteina, y de fármacos que activan el sistema fibrinolitico pueden interferir en las determinaciones de fibrinogeno. Trazar la mejor curva.La curva final debe constar de tres puntos consecutivos como mínimo.

No atemperar la trombina R1 Se han observado interferencias.Las reacciones inflamatorias agudas pueden aumentar el fibrinogeno circulante. La hemolisis puede causar activación de los factores de coagulación e interferir en la detección del punto final. Lo niveles altos de paraproteina, y de fármacos que activan el sistema fibrinolitico pueden interferir en las determinaciones de fibrinogeno. Trazar la mejor curva.La curva final debe constar de tres puntos consecutivos como mínimo.

A 0'2 mL de cada dilución añadimos 20 micro - litros de R3.

Insertamos los 20 micro - litros de en sus correspondientes cubetas

Lo primero que haremos será preparar una dilución 1/10 de muestra y controles con tampón imidazol.

Lo primero que haremos será preparar una dilución de muestra y controles con tampón imidazol.


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